明膠珠

明膠親和介質(zhì)通常用于通過(guò)親和色譜法純化各種蛋白質(zhì)，主要是血清蛋白質(zhì)。Adar's明膠珠子是用高度純化的牛明膠制成的，能夠純化人纖連蛋白。

明膠珠6025-5/10/25號(hào)

親和純化珠。1.1 2007年4月

介紹

明膠親和介質(zhì)常用于各種蛋白質(zhì)的純化，主要是血清

蛋白質(zhì)，通過(guò)親和層析。阿達(dá)爾的明膠珠是用高純度的牛制成的

明膠，可純化人纖維粘連蛋白。

明膠珠規(guī)格

基質(zhì)：sepharosetm cl-4b

耦合方式：TargetLock。

凝膠密度：2-3 mg/ml凝膠

結(jié)合能力：約1毫克纖維結(jié)合蛋白

平均粒徑：40-165微米

珠狀結(jié)構(gòu)：高度交聯(lián)的球形瓊脂糖，4%

大背壓：0.3Mpa，3bar

大流速：4ml/min/cm~2

建議流速：1-3ml/min/cm~2

儲(chǔ)存：4°C，PBS，pH 7.4，添加NaN3 0.1%（w/v）作為防腐劑。

方案：明膠微珠親和純化纖維連接蛋白

A.所需緩沖器

結(jié)合緩沖液（200ml）：50mmK2HPO4，0.15N NaCl，pH 7.4。

洗滌緩沖液（200毫升）：與結(jié)合緩沖液相同-50毫米K2HPO4，0.15 N NaCl，pH值7.4。

洗脫緩沖液（100毫升）：50毫米醋酸鈉，1米NaBr pH值5.0。

儲(chǔ)存緩沖液：含0.1%sodium azide的PBS作為防腐劑。

b.親和純化

一。用5-7毫升明膠填充親和柱，如內(nèi)徑1厘米的Bio-Rad Ecno-Pac

珠。

2.用20體積的結(jié)合緩沖液平衡色譜柱。

三。以0.5-1.0ml/min的速度，在室內(nèi)柱上加載100-200ml含檸檬酸鈉的血漿。

溫度為4度

2.用20體積的清洗緩沖液清洗柱。

三。用洗脫緩沖液洗脫纖維連接蛋白。

c.再平衡和儲(chǔ)存

一。在洗脫步驟結(jié)束時(shí)，立即用10床體積的結(jié)合緩沖液清洗柱。

2.儲(chǔ)存條件：將色譜柱儲(chǔ)存在有儲(chǔ)存緩沖液的冰箱中。